牟丹 , 唐道城 , 唐楠

青海大学高原花卉研究中心，西宁，810016
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2015 年, 第 13 卷, 第 28 篇   doi: 10.13271/j.mpb.013.001388
收稿日期: 2014年12月19日    接受日期: 2015年01月25日    发表日期: 2015年03月21日

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推荐引用：

Mou D., Tang D.C., and Tang N., 2015，Establishment and optimization of SRAP-PCR system for male sterile lines of Tagetes erecta L., Fenzi Zhiwu Yuzhong (Molecular Plant Breeding), 13(6): 1388-1395 (牟丹，唐道城，唐楠，2015，万寿菊雄性不育系SRAP-PCR体系建立与优化，分子植物育种，13(6): 1388-1395)

本研究以万寿菊雄性不育系2-2基因组DNA为试验材料，采用单因素和L₁₆(4⁵)正交设计对SRAP-PCR反应体系的Mg²⁺、dNTPs、Taq酶、引物和模板DNA浓度进行优化，以得到最佳的SRAP-PCR反应体系。结果表明最佳反应体系为：20 μL体系中Mg²⁺ 2.0 mmol/L、dNTPs 0.3 mmol/L、Taq酶0.75 U、引物0.2 μmol/L、模板DNA 80 ng。应用建立的反应体系对退火温度进行优化，得到两步退火温度分别为35℃和50.2℃。最后在9个万寿菊雄性不育两用系材料组对所得PCR体系进行验证，证明该体系具有较高的稳定性和重复性，可为筛选与万寿菊雄性不育基因连锁的特异性标记奠定基础。

万寿菊；雄性不育系；分子标记；相关序列扩增多态性；体系优化